免疫学方法如ELISA和Western blot虽然广泛使用，但在特异性、通量和定量准确性方面存在诸多限制。尤其在面对复杂生物样本和低丰度蛋白时，这些方法常常力不从心。因此，研究者亟需一种灵敏度高、重复性强、定量准确的技术，以满足疾病标志物验证、药物靶点研究和多中心临床样本对比等需求。本文主要对PRM质谱技术在蛋白质定量中的应用与价值进行解析。

一、什么是PRM质谱技术？

PRM是基于高分辨率质谱的靶向蛋白定量技术，通常运行在如Thermo Fisher Orbitrap等高端质谱仪上。它可看作是SRM（Selected Reaction Monitoring）的升级版，在工作流程上类似，但具有更高的特异性和分辨率。PRM通过选中特定的前体离子并对其所有碎片离子进行全面扫描，从而获得完整的MS/MS谱图，极大提高了靶向定量的可靠性。

二、PRM质谱技术在蛋白质定量中的核心优势

1、高特异性

PRM利用高分辨率和高质量精度的质谱检测全范围碎片离子，能有效区分同位素干扰和背景噪音，尤其适用于复杂背景下的蛋白检测。

2、高灵敏度

得益于Orbitrap平台的强大性能，PRM能够实现对低丰度蛋白的精准捕获，使其在生物标志物验证等场景中表现出色。

3、高重复性与可迁移性

相较于SRM依赖于优化过的过渡对，PRM减少了方法开发的主观依赖性，大幅提升了不同实验室、不同批次之间的数据一致性。

4、简化的数据处理

PRM通过全面的碎片离子信息减少了干扰判断的难度，搭配如Skyline等软件平台，数据处理更为直观高效。

三、PRM质谱技术应用场景

1、肿瘤标志物验证

在癌症研究中，PRM常用于LC-MS/MS发现候选标志物后的验证阶段，具有良好的动态范围和重复性。在多组学联合研究中，PRM常用于对DDA发现阶段筛选出的候选蛋白进行验证。其高通量和高灵敏度特性，使其成为构建多标志物panel的理想选择。

2、疾病机制研究

通过动态监测特定蛋白在疾病进程中的表达变化，辅助解析疾病发生机制。如自身免疫病、神经退行性疾病等，PRM可以监测特定蛋白动态变化，为病理机制提供时间维度的分子证据。

3、生物药研发

PRM可用于候选蛋白药物的表达水平监控、免疫原性检测等关键环节。PRM在抗体药物或融合蛋白表达分析中可实现稳定性与纯度检测，亦可用于免疫原性相关蛋白监测，是GMP环境下的理想工具。

4、临床样本对比分析

支持多组织、多时间点、多中心样本的标准化对比，保障研究结果的可重复性。其高度的重复性和抗干扰能力，使PRM适合在多中心临床研究中进行标准化、可比性强的蛋白定量，支持生物标志物的临床转化。

尽管PRM优势显著，其方法开发和数据解析仍需一定专业积累。例如，选择合适的肽段和稳定同位素内标、构建可靠的标准曲线、控制仪器参数等，都是确保实验成功的关键因素。同时，高通量数据的解读也对生信分析平台和专业人员提出更高要求。

百泰派克生物科技PRM解决方案

百泰派克生物科技构建了一整套标准化PRM质谱平台，依托Thermo Fisher Orbitrap Exploris系列仪器，联合自建的靶标蛋白肽段数据库，实现高覆盖率、高准确性的定量分析服务。我们的技术团队拥有丰富的PRM项目经验，能够协助客户完成从靶点筛选、方法开发到数据分析与结果解读的全流程服务。与此同时，我们的生信分析部门可根据客户需求提供可视化报告和深度解读，提升科研产出效率。

PRM质谱技术以其高特异性、高灵敏度和良好的重复性，在蛋白质定量领域日益展现出重要价值。面对日益复杂的生命科学问题，PRM无疑是连接基础研究与临床应用的重要桥梁。百泰派克生物科技将继续以先进的平台、严谨的流程和专业的团队，为科研工作者提供精准、可靠的蛋白质定量解决方案，加速科学发现的每一步。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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