筛选用抗生素

1. G418 Sulfate(Geneticin) 遗传霉素

G-418遗传霉素是一种结构类似于庆大霉素B1（Gentamycin B1）的氨基糖苷类抗生素，通过影响80S核糖体功能和阻断延伸步骤来干扰蛋白合成，对原核和真核等细胞都有毒性，包括细菌、酵母、高等植物和哺乳动物细胞 ，也包括原生动物和蠕虫。

G418筛选浓度：通常情况，哺乳动物细胞筛选范围200-2000 μg/mL；植物细胞：10-100 μg/mL；酵母细胞：500-1000 μg/mL，通常用在实验室研究中用于筛选基因工程细胞。

2. Puromycin Dihydrochloride (嘌呤霉素)

Puromycin dihydrochloride是一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。在原核细胞和真核细胞中，嘌呤霉素都是有效的翻译抑制剂。嘌呤霉素作用迅速，在低浓度下即可快速导致细胞死亡。常用于筛选通过质粒转染/转化、病毒感染等方法能表达pac基因（puror）的真核或原核多克隆或单克隆细胞。嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。

嘌呤霉素筛选浓度：哺乳动物细胞一般对1-10 µg/mL浓度敏感，最佳浓度需要杀灭曲线来确定；LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，使用浓度一般为125 µg/mL。

3. Hygromycin B 潮霉素B

潮霉素B（Hygromycin B）是一种氨基糖苷类抗生素，通过破坏易位和促进80S核糖体的错译来抑制蛋白质合成，常被用作真核细胞的选择剂。主要用来筛选和维持培养稳定转染Hph载体的原核细胞或真核细胞（植物细胞和哺乳动物细胞）。常与G418（Geneticin），Zeocin和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。它的作用模式与Geneticin，Blasticidin S或Zeocin不同，所以非常适合在双选实验中与另一种选择性抗生素结合使用。

潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型、培养基、生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000 μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。一般而言，哺乳动物细胞：50-500 μg/mL；细菌/植物细胞：20-200 μg/mL；真菌：300-1000 μg/mL。

4. Blasticidin S 杀稻瘟菌素S(灭瘟素)

Blasticidin S是一种核苷类抗生素，通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性地抑制原核和真核生物的蛋白质合成。用于筛选携带brs或BSD抗性基因的转染细胞。

Blasticidin S具有快速而强效的作用效果，在很低的抗生素浓度下便能导致细胞快速死亡。大肠杆菌通常对50-100 μg/mL的浓度敏感，而哺乳动物细胞对低至1-50 µg/mL的浓度敏感，通常可在不到一周的时间内即可形成具有Blasticidin S抗性的稳定哺乳动物细胞系。Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/mL。

5. 盐酸博来霉素

盐酸博来霉素是从Streptomyces verticillus中分离的水溶性、铜离子螯合糖蛋白抗生素。

盐酸博来霉素作用谱非常广，其对细菌，真菌（包括酵母菌）、植物和哺乳动物细胞都有很强的抗菌活性，因此盐酸博来霉素常用作一种非常有效的工具抗生素，用来筛选携带Sh ble抗性基因并能稳定表达分子量为13.665 kDa的一种盐酸博来霉素抗性蛋白的细胞株。盐酸博来霉素筛选浓度：大肠杆菌（E. coli）：25-50 µg/mL，用低盐LB培养基筛选（NaCl浓度不能超过5 g/L)；哺乳动物细胞：50-1000 µg/mL，根据细胞选择合适的培养基。

6. Timentin 特美汀

特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广，多种革兰氏阳性菌（G+）和阴性菌（G-）都能产生β-内酰胺酶，这类酶能在青霉素作用于病原体之前将其破坏，在科研中常用于抑制农杆菌生长，特别在胚性愈伤组织再生系统中，能达到很好的抑菌和再生效果。

抑制用抗生素

1. 硫酸博来霉素（Bleomycin sulfate）

硫酸博来霉素是一种糖肽类抗生素，是DNA损伤剂，能抑制DNA合成，作用谱很广，对细菌、真菌（包括酵母菌）、植物和哺乳动物细胞都有很强的抗菌活性，因此常用作一种非常有效的工具抗生素，也可用作转化细胞的选择剂，特别是对于植物细胞的转化。

在氧和金属离子（尤其是铜和铁）的存在下，博莱霉素形成一种诱导DNA裂解的伪酶。

Bleomycin sulfate作用于鳞状细胞癌，400 µg/mL培养24小时，会降低NTera-2细胞的活性，增加caspase-3，-8和-9的活性，增加Bax和细胞质细胞色素C水平，并降低Bcl-2水平。暴露于Bleomycin sulfate的细胞处理10天后，端粒融合体的外观表明Bleomycin sulfate能够诱导延迟的端粒失稳。

2. Wortmannin渥曼青霉素

Wortmannin是一种真菌代谢物，选择性的PI3K抑制剂，IC50为3 nM，可抑制自噬体的形成，通过抑制PI3K/Akt信号转导级联通路，Wortmannin增强了辐射或血清饥饿诱发的细胞凋亡以及阻断细胞因子介导的抗凋亡效应。大鼠脂肪细胞中，wortmannin能够阻断胰岛素受体激活的许多短期代谢活动，而且不会影响胰岛素受体酪氨酸激酶活性。与LY188011联合使用时，Wortmannin显著提高细胞凋亡，并抑制肿瘤生长。

3. Staurosporine (Antibiotic AM-2282,Stsp) 星孢菌素

Staurosporine，又称星形孢菌素，是一种强效的、ATP竞争性激酶抑制剂，有效抑制PKC活性，在大鼠脑组织实验中，IC50为2.7 nM。Staurosporine强效抑制PKC-α，除此之外，Staurosporine还抑制PKA、PKG、p60v-src酪氨酸蛋白激酶和钙调蛋白激酶II等。Staurosporine抑制多种人癌细胞增殖，主要作用表现为诱导癌细胞G2/M期阻断，调整G1期阻断，并诱导细胞凋亡。另外，Staurosporine具有多种生物学作用，如细胞毒性、松弛平滑肌和调节eNOS基因表达等。

4. Trichostatin A 曲古柳菌素A

Trichostatin A（TSA，曲古柳菌素A）是一种有效的组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂，也是一种具有细胞抑制和分化特性的抗真菌抗生素，选择性、有效抑制HDAC活性（IC50≈1.8 nM）。TSA抑制哺乳动物细胞生长和分化，对癌细胞具有非常高的选择性，抑制多种癌细胞增殖，包括MCF-7、T-47D和ZR-75-1等，并引起组蛋白H4高度乙酰化。另外，TSA具有抗炎症和神经保护作用。

5. Actinomycin D放线菌素D 

Actinomycin D放线菌素D（更生霉素），是一种从链霉菌属的土壤细菌中的分离的多肽抗生素，与双链DNA结合形成稳定复合物，从而抑制DNA修复，还会导致DNA的单链断裂，抑制RNA的合成，作用于mRNA干扰细胞的转录过程，还可使细胞周期停滞在G1期，进而抑制细胞增殖。放线菌素D可提高放射敏感性，与放射治疗同时使用，可提高肿瘤对放射的敏感性。

6. Mitomycin C丝裂霉素C

Mitomycin C（丝裂霉素C, Ametycine）是一种抗肿瘤类抗生素，也是DNA交联剂(DNA cross-linking agent)，通过抑制DNA合成发挥作用，诱导DNA损伤，可用于癌症治疗。Mitomycin C是一种ADC毒性分子(ADC Cytotoxin)，可诱导半胱氨酸蛋白酶依赖性和Fas/CD95非依赖性的凋亡 (Apoptosis) 作用。

调节细胞用抗生素

1. Ionomycin,Free Base 离子霉素,游离酸

离子霉素(Ionomycin)，一种聚醚类窄谱抗生素，有效作用于G+菌。常用作一种有效的钙离子载体，高度选择性结合钙离子(Ca2+ >Mg2+ >>Sr2+=Ba2+)，通过直接刺激钙池调控钙内流(Store- operated calcium entry)跨越生物膜而增强钙离子内流。离子霉素可动员细胞内钙离子存储，提高胞内钙离子水平，常作为一种工具用以钙离子介导的细胞内信号通路研究。

细胞信号通路研究中，Ionomycin常与PMA (Cat# 50601ES)联合使用刺激细胞产生细胞因子，以及与蛋白转运抑制剂如Monensin(Cat# 50501ES)和Brefeldin A(Cat# 50502ES、50504ES)连用研究细胞因子在细胞内的滞留等。

2. Brefeldin A 布雷非德菌素A

Brefeldin A，简称BFA，一种常用的可逆性蛋白转运抑制剂，是一种真菌代谢产物，可破坏高尔基体的结构并抑制其功能，进而特异地阻断蛋白质从内质网(ER)向高尔基体(Golgi)的转运。BFA 可抑制coat proteins（如β-COP and ADP-ribosylation factor (ARF)）与高尔基体的结合并抑制GDP-GTP交换。

Brefeldin A也常被用于抑制细胞因子等蛋白的分泌，并用于增强分泌蛋白的免疫染色检测。Brefeldin A可激活神经鞘磷脂循环(sphingomyelin cycle)，还可诱导一些肿瘤细胞发生凋亡。

其他常用抗生素合集