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HacaT细胞培养建议

作者:南京森贝伽生物科技有限公司 2022-09-07T10:46 (访问量:5397)

一、细胞概述

HacaT(人永生化角质形成细胞),该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤,角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。

二、细胞培养条件

三、细胞培养建议

1、细胞复苏:将含有1ml细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5ml培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心3min,弃去上清液,补加4-6ml完全培养基吹匀。然后将细胞悬液加入培养瓶中过夜,第二天检查细胞密度并换液。

2、细胞传代:当细胞密度达到80%-90%,即可进行传代培养。

2.1弃去培养液上清,用不含钙、镁离子的PBS BC-BPBS01润洗细胞2次。

2.2加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-EDTA)BC-CE-005于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化3-5min,镜下观察细胞大部分圆缩并脱落,肉眼观察细胞培养瓶上部细胞呈挂线状滑落,迅速拿回操作台,于手心轻敲几下培养瓶,可见细胞呈沙粒状滑落,加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

2.3轻轻吹打细胞,完全脱落分散后吸出,在1000RPM条件下离心3min,弃去上清液,补加1-2ml吹匀。

2.4按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞重按1:2到1:3的比例分到新的培养瓶中。

四、细胞图片

Bio-Channel FBS(Superfine)

Bio-Channel FBS(Characterized)

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