编者按

 当前，免疫疗法已成为肿瘤治疗的一种主要方法，但仍有许多肿瘤可以逃避免疫疗法的治疗，尤其对恶性肿瘤前期或早期浸润性肿瘤如何逃避免疫检测知之甚少。结直肠癌（CRC) 因其高度免疫抑制的肿瘤微环境对免疫治疗反应不敏感。为了改进目前的免疫疗法，识别并了解这种免疫功能失调微环境的机制至关重要。

2024年2月28日，哈佛大学医学院Judith Agudo团队与麻省理工学院Ömer H. Yilmaz团队在Nature上联合发表了题为“SOX17 enables immune evasion of early colorectal adenomas and cancers”的最新研究，该研究利用结直肠癌类器官原位移植方法，发现促进肿瘤免疫逃逸的关键因子SOX17，揭示了SOX17在结直肠癌（CRC) 中被诱导表达从而促进Lgr5+细胞转化成免疫原性弱的Lgr5-细胞，同时也削弱了肿瘤细胞对IFNg的敏感性，抑制效应CD8+T细胞的浸润，从而形成了免疫抑制的肿瘤微环境，促进结直肠癌的发生和发展。

文章题目

SOX17 enables immune evasion of early colorectal adenomas and cancers

杂志：Nature（IF=64.8）

发表时间：2024.2.28

作者：Judith Agudo、Ömer H. Yilmaz等

单位：美国哈佛大学医学院、麻省理工学院

01、研究背景

结直肠癌（Colorectal Cancer，CRC)，是一种原发性恶性肿瘤，包括结肠癌和直肠癌，在我国恶性肿瘤中发病率位居第2位、死亡率第4位，已成为严重威胁人类生命健康的公共卫生问题。目前，我国绝大部分结直肠癌均由结直肠腺瘤演变而来。

癌症的标志是避免免疫破坏，一些早期癌细胞会设法逃避这种免疫监视，从而发展成更晚期的肿瘤，即免疫逃逸。结直肠癌（CRC）的特点是具有高度免疫抑制的微环境，并会对免疫治疗产生耐药性。然而，在结直肠癌发展的早期阶段，这种免疫抑制环境是如何演变的，仍然知之甚少。因此，识别并调控这种免疫功能失调微环境的机制对改进当前结直肠癌（CRC）的免疫治疗方法至关重要。

在这里，为了理解早期结直肠癌（CRC）的过程，研究人员首次揭示了SOX17可使早期结直肠腺瘤和癌症实现免疫逃逸，并强调了阻断SOX17功能或其激活途径有望为癌症早期治疗带来新的方向和策略。

02、研究结果

1、SOX17在结直肠癌中被诱导

研究人员通过将结直肠癌（CRC) 类器官原位移植到小鼠结肠，模拟体内CRC从早期到晚期的演变过程。经过RNA-seq和ATAC-seq联合分析发现，体内结肠环境会诱发原发性CRC类器官衍生体发生稳定的、可遗传的转录组和表观遗传变化，且SOX17转录因子的染色质可及性和转录水平都显著上调，IHC染色也证实了组学分析的发现。

实验结果表明，在小鼠体内结肠环境中移植CRC类器官导致SOX17转录因子的表达上调。

图1

2、SOX17抑制免疫清除

随后，研究人员对SOX17在CRC演变过程中的作用进行了研究。通过CRISPR-Cas9在CRC类器官中敲除Sox17基因，再进行移植手术，发现SOX17的缺失导致只有6%的荷瘤小鼠，且肿瘤体积减小，肿瘤组织中免疫细胞浸润增加；而野生型CRC类器官移植小鼠免疫浸润表型刚好相反，且SOX17缺失不影响免疫缺陷小鼠肿瘤的发生。

与之前的报道一致，对照组AKP肿瘤浸润不良且为“免疫冷”（图2h、i），而少数存活的SOX17-null肿瘤显示出强大的肿瘤内免疫细胞浸润，包括许多CD4+和CD8+T细胞（图2h、i）。为了进一步验证SOX17在体内的表达可能抑制抗肿瘤免疫反应，研究人员将SOX17-null AKP类器官移植到有免疫缺陷的NCG小鼠或Rag2-/-小鼠中，发现与对照组相比，所有受体小鼠均出现肿瘤，肿瘤大小没有显著差异（图2k，l），这表明SOX17在体内通过抑制免疫清除促进肿瘤的发展。

图2

3、SOX17 抑制IFNγ信号传导

在内源性Apc缺失的恶性肿瘤和类器官移植衍生的AKP结直肠癌中，SOX17都会抑制干扰素-γ（IFNγ），阻止抗肿瘤T细胞的反应，因此，IFNγ被看作是免疫系统对抗癌细胞的重要标志之一。

为了进一步研究肿瘤细胞中的SOX17如何调控肿瘤相关免疫环境的变化，研究人员采用scRNA-seq对SOX17缺失和野生型CRC类器官移植的小鼠T细胞进行重新聚类。在对照肿瘤中，终末期耗尽的CD8+T细胞构成了第4周时CD8+T细胞的主要群体（29%）；而具有较强抗肿瘤杀伤能力的效应性CD8+T细胞成为中数量最多的。相反，这种细胞毒性群体仅在对照肿瘤稀疏检测到，与CRC的免疫抑制环境一致。流式细胞术分析证实，与对照肿瘤相比，SOX17缺失肿瘤中CD8+T细胞产生IFNγ和TNF的能力显著增强。

随后，研究人员对CD8+和CD4+T细胞在肿瘤中介导SOX17效应进行研究，发现CD8+T细胞耗竭使所有SOX17缺失的肿瘤生长（图3h-j），表明在免疫正常的小鼠中，SOX17缺失的肿瘤被CD8+T细胞清除。与CD8+T细胞缺失的小鼠相比，CD4+T细胞缺失的小鼠肿瘤体积明显较小。这些数据表明，SOX17缺失的肿瘤中，TH1细胞可能支持CD8+T细胞介导的抗肿瘤反应。综上所述，实验结果表明，效应性CD8+T细胞激活了对SOX17缺失肿瘤的排斥反应，而CD4+T效应性TH1细胞在维持和增强CD8+T细胞反应中发挥了重要作用。

为了研究SOX17在结肠癌细胞中抑制IFNγ信号的机制，研究人员通过使用中和IFNγ的抗体或IFNAR1的抗体处理小鼠比较肿瘤的移植成活率，结果显示SOX17直接抑制Ifngr1的表达，SOX17敲除的肿瘤表现出增强的IFNγ反应，IFNγ的中和抗体显著增强了肿瘤的移植成活率，这表明SOX17通过抑制癌细胞中IFNγ级联信号中关键基因的表达，有效阻止抗肿瘤CD8+T细胞反应的形成，从而保护结肠癌不被免疫清除。

图3

4、SOX17促进肿瘤免疫逃逸

LGR5+肠道干细胞中的APC的缺失诱发癌前腺瘤形成的级联反应。为了评估SOX17在早期结直肠癌的必要性，研究人员同时抑制小鼠体内LGR5+肠道干细胞中的APC和SOX17，发现Apc敲除小鼠有效形成了腺瘤，SOX17的缺失显著降低了肿瘤负荷，这表明SOX17在肿瘤形成中具有重要作用，且SOX17的表达与CD8+T细胞和CD4+细胞的存在呈负相关。

图4

03、编者点评

综上，本研究发现SOX17是一种转录因子，在肿瘤早期阶段中发挥着重要作用，不仅可以在体内介导肿瘤的表观遗传重编程，产生LGR5-细胞，而且可以抑制CRC对IFNγ的信号传导，并促进早期结肠癌肿瘤的免疫逃逸。当SOX17在癌细胞中被激活时，它会帮助细胞创造一个免疫抑制环境，因此，阻断SOX17功能或其激活途径来阻断结直肠癌的发生发展，有望为早期癌症治疗带来新的方向和策略。

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