组织样本样本做ELISA实验如何减少实验误差
常会有来自学校客户咨询：用动物组织样本做ELISA时实验，如何确定排除检测误差?它与westernblot定量哪个实验结果更可靠？
远慕资深技术解析：
一、定量检测的话肯定是选ELISA。Westernblot只是一个半定量的实验方法。
二、关于排除检测误差：
1）实验人员一定要选好合适的内参，比如可以测目标蛋白/总蛋白，则内参是总蛋白量，如果使用目标蛋白/总组织重量，则很不准确，因为抽提过程的效率不稳定，即每克组织能够提取出来的蛋白量不固定，而且每个组织含水/含不相干的组织量也不同。建议可以参考相关文献来选择内参。
2）最普通的查验误差的办法，每个试样多测几个孔。一般至少两个，三个更好。确定每个孔读数一致或非常相近，则知道结果比较可信。
组织样本的处理原则：
1，称取的组织重量不能低于50mg。
3，组织在匀浆器匀浆过程中，匀浆液应该分2次加进去，这样匀浆更充分。
4，充分匀浆完成后离心取上清，离心机的转数选取2000-3000转每分，转数不宜超过5000.离心时间为15-30分钟！
2，匀浆的比例按照10%，即1g组织加9ml的匀浆液，匀浆液一般选取PBS（PH=7.2-7.4）