今天百萤为大家介绍一个非常实用的小技巧，用于确定荧光分子的亮度。如果你想选购一种荧光探针，而你已经确切的了解到了几种探针均可以满足你的实验要求，但是，哪一个才是荧光强度好的呢？求人不如求己，实验还得靠自己！今天小萤告诉你之后，请收藏好它！
荧光分子的亮度取决于两个因素：
1. 消光系数（ε):荧光分子吸收特定波长的光的强度。
2. 荧光量子产率（Φ）:吸收光转换为发射光的效率。
有小伙伴要问了，知道了消光系数和荧光量子产率又该怎么办呢？请记住以下公式：
亮度=消光系数（ε） x 荧光量子产率（Φ）
实例验证:大家对于PE、APC、Cy5应该都是比较熟悉的。
· PE = 1,960,000 cm-1M-1 （ε)x 0.84（Φ） = 1646400
· APC = 700,000 cm-1M-1 （ε)x 0.68 （Φ）= 476000
· Cy5 = 250,000 cm-1M-1 （ε)x 0.20 （Φ）= 50000
现在相信大家不用我说，也能看出哪个更亮了吧！那有小伙伴又要问了，可是荧光探针那么多，我找不到确切的消光系数和荧光量子产量啊！别着急，下面是我们为您总结好的常用的产品消光系数和荧光量子产率请收好！
|
产品名称 |
消光系数（ε）cm-1M-1 |
荧光量子产率（Φ） |
备注 |
|
iFluor 350 |
20000 |
0.95 |
在水性缓冲液中（pH=7.2） |
|
iFluor 405 |
37000 |
0.91 |
|
|
iFluor 430 |
40000 |
0.78 |
|
|
iFluor 450 |
40000 |
0.82 |
|
|
iFluor 488 |
75000 |
0.9 |
|
|
iFluor 514 |
80000 |
0.83 |
|
|
iFluor 532 |
90000 |
0.68 |
|
|
iFluor 546 |
100000 |
0.67 |
|
|
iFluor 555 |
100000 |
0.64 |
|
|
iFluor 560 |
120000 |
0.57 |
|
|
iFluor 568 |
100000 |
0.57 |
|
|
iFluor 594 |
180000 |
0.53 |
|
|
iFluor 610 |
110000 |
0.85 |
|
|
iFluor 633 |
250000 |
0.29 |
|
|
iFluor 647 |
250000 |
0.25 |
|
|
iFluor 660 |
250000 |
0.26 |
|
|
iFluor 670 |
250000 |
0.63 |
|
|
iFluor 680 |
220000 |
0.23 |
|
|
iFluor 700 |
220000 |
0.23 |
|
|
iFluor 750 |
275000 |
0.12 |
|
|
iFluor 790 |
250000 |
0.13 |
|
|
iFluor 800 |
250000 |
0.11 |
|
|
iFluor 810 |
250000 |
0.05 |
|
|
iFluor 820 |
250000 |
N/D |
|
|
iFluor 840 |
200000 |
0.02 |
在PBS中 |
|
产品名称 |
消光系数（ε）cm-1M-1 |
荧光量子产率（Φ） |
备注 |
|
Alexa Fluor 488 |
73000 |
0.92 |
缓冲液（pH=7.2） |
|
Alexa Fluor 532 |
81000 |
0.61 |
|
|
Alexa Fluor 546 |
112000 |
0.1 |
|
|
Alexa Fluor 568 |
88000 |
0.69 |
|
|
Alexa Fluor 594 |
92000 |
0.66 |
|
|
Alexa Fluor 647 |
270000 |
0.33 |
|
|
Alexa Fluor 660 |
132000 |
0.37 |
|
|
Alexa Fluor 680 |
183000 |
0.36 |
|
|
Alexa Fluor 700 |
205000 |
0.25 |
|
|
Alexa Fluor 750 |
290000 |
0.12 |
|
产品名称 |
消光系数（ε）cm-1M-1 |
荧光量子产率（Φ） |
备注 |
|
Cy3 |
150000 |
0.04 |
|
|
Cy3B |
120000 |
0.58 |
|
|
Cy3B酸 |
120000 |
0.58 |
|
|
Cy5 |
250000 |
0.27(PBS)/0.4(乙醇) |
|
|
Fluo-4 |
82000 |
0.16 |
|
|
Fluo-8 |
23430 |
0.16 |
|
|
Cal-590 |
78000 |
0.62 |
|
|
7-AAD |
27500 |
0.02 |
在双链DNA结合的情况下 |
|
AFC |
17000 |
0.53 |
在乙醇中 |
|
Hoechst 33258 |
46000 |
0.034 |
|
|
SYTO 17 |
88000 |
0.964 |
|
|
SYTOX绿色 |
67000 |
0.53 |
在DNA中 |
|
JOJO-1 |
171000 |
0.44 |
在DNA中 |
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