原代细胞培养，看似一个简单的问题，但实际真的经历过百转迁回的实验摸索后才发现真的要总结一下原代培养的这些小窍门：

先看看啥是原代细胞吧

原代细胞是从活体组织（例如活检材料）中直接获取，并在体外培养的细胞。由于这些细胞经历极少的群体倍增，因此比连续（肿瘤或人工永生化的）细胞系更能代表其来源组织的主要功能成分，使原代细胞成为体内状态更具代表性的模型;

处理样本容易踩的坑：

错误的方式：样本解冻后直接开始提取细胞

答：很容易让细胞污染，在冻存样本之前无论经过什么样的处理，在接收样本开始处理时，我们都需要先用hanks液进行清洗1-2次，再用纯双抗浸泡或者吹打30秒-1分钟，以完全排除污染。

切记切记要不然就会功亏一篑。

提取细胞时容易踩的坑：

1. 消化液不对，常见的组织消化液有胶原酶1，胶原酶2，各大公司生产的各种特效的胰酶等等，不同的部位的组织使用对应的消化液，让原代提取事半功倍；比如上皮细胞的提取通常用胰酶即可 ，处理好组织后，将组织浸泡在胰酶中，置于4°，第二天轻松得到上皮细胞。

提出来的细胞鱼龙混杂；

本来要提取的是内皮细胞；

一顿神操作下来

放培养箱后第二天一瞅，

自己都呆了，

眼花缭乱都不足以形容自己提取的这盘细胞，

随便数一下起码4.5种

以下是一些原代的正常图片,仅供参考,有其他形态对比需要后台联系我们哦：

        上皮细胞                   内皮细胞                成纤维细胞               平滑肌细胞

原代细胞去杂质需要掌握的方法：

1. 采用时差贴壁法：成纤维细胞1-2小时可以贴上，角化细胞4小时内，胶质细胞1小时左右全部贴壁，神经细胞6小时开始贴壁，一般8-10个小时贴壁完成，最长的细胞贴壁时间也在48小时内，要是超过48小时没有贴壁，就狠心扔掉吧，那已经不是你的宝了

2. 采用专用培养基去细胞杂质：各种原代细胞都有其需要的生长因子，激素和受体，因此，各大商家经过对细胞长期的研究，都会有各种各样的针对原代细胞培养采用的培养体系

品牌太多

选择困难症又要爆发啦

那么就选我们吧

启达生物拥有32种原代细胞培养体系， 18种肿瘤原代细胞培养体系，16种类器官培养体系，这些都是以低血清和无血清方式供货的哦

低血清和无血清培养体系首先有助力抑制杂细胞生长，提高目的细胞生长的速度，其次，启达生物的基础培养基中含有抵抗非目的细胞生长的小分子化合物，抑制杂细胞生长；再次，生长因子含有目的细胞生长所需蛋白，为目的细胞的生长保驾护航

3.磁珠筛选法：磁珠分离是一种快速，高效，清洁的过程，科学家用其取代过滤，离心和分离技术。 磁珠和磁微粒通过功能化的抗原，抗体，催化剂，蛋白或核酸发挥作用，对细胞，细菌，病毒和其他生物体发挥作用。 然后利用磁性分离器将这些成分从复杂的基质中分离出来。 结果就是从目标整体中浓缩富集出样本,磁珠筛选的步骤公众号之前发过，有需要的同学往回看哦

4.高速离心沉淀法去杂质，顾名思义使用重力离心，不同种类的细胞会聚集到一个层面，一般在提取血液细胞的时候用的最多

点个关注，细胞提取不迷路，下一节，我们将整理怎么避免原代细胞提取时污染！