小肠耶尔森氏菌及其检测方法-分析方法-资讯-生物在线

小肠耶尔森氏菌及其检测方法

作者:天津生物芯片技术有限责任公司 2013-08-08T00:00 (访问量:1249)

一、 小肠耶尔森氏菌

   小肠结肠炎耶尔森氏菌,简称小肠耶尔森氏菌,学名Yersinia enterocolitica,是革兰氏阴性杆菌或球杆菌,大小为1-3.5×0.5-1.3μm,多单个散在,有时排列成短链或成堆。该菌是能在冷藏温度下生长的少数几种肠道致病菌之一,在4℃条件下能保存和繁殖。
小肠耶尔森氏菌在自然界分布很广:
(1) 作为重要的食源性致病菌,该菌在生的蔬菜、乳和乳制品、肉类、豆制品、沙拉、牡蛎、蛤和虾等食物中也分布很广,很多国家都已将该菌列为进出口食品的常规检测项目。
(2) 该菌也存在于环境中,如湖泊、河流、土壤和植被。
(3) 该菌天然寄居在多种动物体内,如鼠、狗、猫、山羊、家畜等,在港湾周围,许多鸟类包括水禽和海鸥可能是带菌者。
    小肠耶尔森氏菌通过污染食物(牛奶、猪肉等)和水,经粪—口途径感染或因接触染疫动物而感染,易染人群为婴幼儿。典型症状常为发热、腹痛、腹泻和呕吐。有的引起反应性关节炎,还有少数患者可表现为脑膜炎、肺炎、败血症即血液系统感染,尽管少见,但死亡率较高。

二、 小肠耶尔森氏菌检测方法
1. 细菌培养法
    本菌生长温度为30-37℃,但在22-29℃才能使本菌的某些特性出现。4℃时能保存和繁殖。本菌世代时间长,最短亦需40分钟左右。在SS或麦康凯琼脂上于25℃经24小时培养,菌落细小,至48小时直径才增大成0.5-3.0mm。菌落圆整、光滑、湿润、扁平或稍隆起,透明或半透明;在麦康凯琼脂上菌落淡黄色,如若微带红色,则菌落中心的红色常稍深。本菌在肉汤中生长呈均匀混浊,一般不形成菌膜。
2. 生化鉴定法
从营养琼脂平板上挑取单个菌落做生化实验,所有的反应皆在26℃±1℃培养。主要生化特性如下:
① 动力(26℃)阳性;
② 素酶阳性;
③ VP试验(26℃)阳性;
④ 鸟氨酸脱羧酶阳性;
⑤  蔗糖有不同生化型;
⑥ 棉子糖阴性;
⑦ 山梨醇阳性;
⑧ 甘露醇阳性;
⑨ 鼠李糖阴性。
3. 血清凝集法
   小肠结肠炎耶尔森氏菌的抗原结构较为复杂,现已知有84个O抗原因子和19个H抗原因子,在同一血清型的菌株中,可含两种或更多的O抗原。小肠耶尔森氏菌在我国分布很广,菌群复杂,目前主要占优势的血清型为O:3,O:5,O:8和O:9型。某些O抗原同其他细菌有共同性,如O:9与布氏菌有交叉反应,O:12血清与沙门氏菌有交叉反应等,在流行病学调查中,血清学诊断起着较为重要的作用。

4. 核酸扩增法
   核酸扩增技术,即聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸,作为引物,对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端,然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增,使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。

 

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