主动脉病变常见于心血管系统疾病或代谢类疾病，如动脉粥样硬化、主动脉夹层、肥胖症、糖尿病、高血压、瓣膜疾病、主动脉瘤等，或介入类操作的并发症。动物实验作为临床诊疗的重要支撑，已经得到全面而广泛的应用，而其中啮齿类动物实验居各种动物实验首位。啮齿类动物实验中，常用的小鼠和大鼠品系选择多，其有体型小、易于饲养管理、性情温顺、成本低廉等优点。然而实验鼠体型较小，其脉管系统也更微细，对实验鼠脉管系统的实验操作更考验实验人员的操作技术。

深圳灵赋拓普生物科技有限公司动物技术团队在实验鼠全主动脉取材方面拥有精湛的技术以及丰富的经验，今天我们就来分享实验鼠全主动脉如何取材。

实验鼠深度麻醉后，左心室灌注清洗和保护主要动脉血管，并剔除多余脏器，剪除胸腺暴露心耳和主动脉弓；先分离头臂干，然后自起始部离断右锁骨下动脉，继续向远心端分离右颈总动脉至合适长度；之后依次分离左颈总动脉和左锁骨下动脉至合适长度；后续延降主动脉、胸主动脉、腹主动脉继续分离血管，自起始部离断肋间动脉、支气管支等分支血管，仅分离和保留左右肾动脉合适长度，至分离出左右髂总动脉合适长度结束。最后将已完全游离的血管，自右颈总动脉开始依次离断，获得完整的主要动脉血管，迅速置于保存液中用于后续实验。

成功获取的实验鼠全主动脉用途很广。如动脉粥样硬化模型，主动脉内膜、肌层甚至外膜都有脂肪浸润，可用大体油红O染色方法对管壁脂肪进行显影染色，之后拍照、对油红O染色区域进行定量及统计分析。将取好的主动脉进行液氮速冻做冰冻切片，亦可做镜下油红O染色。本文提及的特殊染色，灵赋拓普均可提供染色区域定量分析及统计绘图服务。

图1 全主动脉大体油红O染色（内壁面）

图2 主动脉瓣冰冻切片后油红O染色

又如主动脉夹层模型，由于取材前模型灌注仅能清除管内血液，夹层内的血液或血凝块无法清除，取材后无需染色，肉眼即可看见夹层区域。同样可进行定量统计分析。

图3 主动脉夹层及对照样本（A正常样本，B病变样本）

取好的主动脉进行福尔马林固定，制成石蜡切片，还可以使用茜素红染色和Von Kossa染色观察主动脉管壁钙化程度。

图4 茜素红染色及Von Kossa染色对钙盐沉积的显影作用

还可以取病变局部区域进行常规分子实验，如蛋白电泳、实时荧光定量PCR、组学检测等等，可以说是“一管在手，Paper我有”了。

【参考文献】

[1] Zeng P, Yang J, Liu L, Yang X, Yao Z, Ma C, Zhu H, Su J, Zhao Q, Feng K, Yang S, Zhu Y, Li X, Wang W, Duan Y, Han J, Chen Y. ERK1/2 inhibition reduces vascular calcification by activating miR-126-3p-DKK1/LRP6 pathway. Theranostics. 2021 Jan 1;11(3):1129-1146. doi: 10.7150/thno.49771. PMID: 33391525; PMCID: PMC7738895.

[2] 中国科学院广州生物医药与健康研究院：小鼠心脏主动脉瓣油红O染色2

[3]bilibili.com/video/BV1v84y1D7ZX