百萤小课堂又给大家分享知识啦！今天给大家讲解的内容是关于细胞信号传导。

    在生物学中，细胞信号传导是控制基本和复杂细胞过程的通信网络。根据信号的性质，它可以分为生物化学信号或机械信号。生化信号由蛋白质、脂质、离子或激素等生化分子产生。对这些生化试剂的检测可以揭示该特定类型信号传导途径的状态。

   信号网络的破坏通常会导致癌症、免疫疾病和代谢紊乱等疾病。通过了解信号通路，研究人员和临床医生也许能够有效且高效的治疗疾病。AAT Bioquest提供广泛的检测方法，对涉及细胞信号传导途径的各种酶、蛋白质或小分子进行经济有效的分析。灵敏度和重现性测量磷酸化、甲基化和乙酰化等活性。

1.二磷酸腺苷检测

   二磷酸腺苷（ADP）是一种重要的有机分子，在细胞代谢中发挥着重要作用。它是 ATP 去磷酸化的产物，ATP 去磷酸化是活细胞中能量转移所必需的关键反应，并且可以通过再磷酸化再循环回 ATP。ADP 和 ATP 的这种相互转化主要通过 ATP 酶（例如磷酸酶、磷酸化酶和激酶）在线粒体和叶绿体中发生。ADP 储存在血小板内的致密体中。当血小板被激活时，ADP 被释放，与嘌呤能受体家族相互作用，从而调节细胞功能。

   PhosphoWorks™ 荧光 ADP 测定提供了一种监测 ADP 形成的灵敏方法。在这种酶偶联测定中，ADP 的形成是通过监测激酶活性（由于它们的比例关系）来测量的。

图1.ADP 剂量反应通过 PhosphoWorks™ 荧光 ADP 检测试剂盒（货号 21655）在实心黑色 384 孔板中使用 Gemini 荧光酶标仪（Molecular Devices）进行测量。孵育 15、30 分钟和 1 小时即可检测低至 0.3 µM ADP（Z' 系数 =0.65）。

表一.用于检测ADP活性、形成或消耗的生化分析

2.三磷酸腺苷检测

   三磷酸腺苷(ATP)是一种复杂的有机分子，参与细胞能量生成、代谢调节和细胞信号传导。它作为主要能量存在于所有生物体中，并且在没有活生物体的情况下会迅速降解。因此，ATP测定是一种有用的工具，可用于各种研究应用，以识别活生物体。常见应用包括细胞活力和细胞毒性、表面细菌的检测、水中细菌的检测、培养中的体细胞以及食品质量和污染检测等。

   我们的PhosphoWorks发光法ATP检测提供了一种快速、简单的生物发光法，可用于通过ATP检测来确定哺乳动物细胞的细胞活力、细胞毒性和增殖。

图2.使用PhosphoWorks发光法ATP检测试剂盒（货号21610）在96孔板上使用NOVOstar酶标仪(BMG Labtech)检测ATP计量反应。

表二.用于检测ATP活性、形成或消耗的试剂

3.环磷酸腺苷检测

   环磷酸腺苷 (cAMP) 是许多生物途径中重要的第二信使。它在许多生物体中用于细胞内信号转导，传递 cAMP 依赖性途径，并参与蛋白激酶的激活和离子通道调节。cAMP 源自 ATP，由质膜结合的腺苷酸环化酶合成，该酶与跨膜受体偶联。腺苷酸环化酶的激活是由一系列信号分子启动的。这些分子与GPCR等受体相互作用，启动腺苷酸环化酶活性并增加细胞内 cAMP 水平。cAMP 激活 cAMP 依赖性蛋白激酶，负责磷酸化特定底物蛋白。cAMP 活性的测定可用于评估受体激活、受体表征和受体-配体鉴定的功能测定。

图3.使用Screen Quest比色法ELISA cAMP检测试剂盒(Cat#36370)在带有SpectraMax酶标仪的透明96孔板中检测cAMP计量反应。

表3.用于检测G蛋白偶联受体系统中腺苷酸环化酶活性